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    NOD樣受體1elisa試劑盒的性能和操作流程

    點擊次數:1375  更新時間:2021-02-18
       NOD樣受體1elisa試劑盒的性能:
      準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值。
      靈敏度:檢測濃度小于0.1pg/mL。
      特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
      重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。
      貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
     
      NOD樣受體1elisa試劑盒的操作流程如下:
      (1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
     
      (2)酶標板置4℃,包被過夜。
     
      (3)洗板:吸干孔內反應液,產品僅用于科研用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
     
      (4)陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
     
      (5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
     
      (6)洗板。
     
      (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
     
      (8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
     
      (9)洗板。
     
      (10)每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
     
      (11)每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。
     
      (12)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,測得的OD值為兩者之差,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
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