PRODUCTS
    產品中心
  1. ELISA試劑盒
  2. 細胞
  3. 質粒
  4. 標準品
  5. PCR基因檢測試劑盒
  6. 生化試劑
  7. 生化檢測試劑盒
  8. 抗體
  9. 細胞系
  10. 原代細胞
  11. 細胞培養基
  12. 細胞分析
  13. 中藥標準品
  14. 技術文章/ARTICLES

    首頁   >    技術文章   >   ELISA檢測的樣本

    ELISA檢測的樣本

    點擊次數:1558  更新時間:2016-02-24

        ELISA試劑盒通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步。
    1、  血清
        血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
        用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃一個晚上,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
        采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。
    2、  血漿
        ELISA試劑盒用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本,標本采集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。    常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
    3、  細胞培養上清
        取細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
    4、  細胞裂解液
    1)  吸去培養板內的培養基,用胰酶消化細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。
    2)  收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。
    3)  加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
    4)  將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。
    5)  4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
    5、組織勻漿液
    1)  將組織樣本用PBS (0.01 [錨點] [錨點] M, PH 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質。
    2)  將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應盡量小,便于勻漿得更充分
    3)  將組織按一定的比例加入預冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中。(通常按組織重量:PBS體積=1:9的比例勻漿,例如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,檢測后計算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數)
    4)  吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
    6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本
    1000×g離心20min,取上清即可檢測。
        ELISA試劑盒總的來說,因為ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應保證所有樣本均為澄清的液體,沉淀或懸浮物都應離心去除。
        為了保證檢測的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個月內檢測;4℃保存的樣本應在1周內進行檢測。
        另外,還應保證樣本不含NaN3,因為NaN3會抑制HRP的活性,從而導致假陰性的結果。

    關注我們:

    © 2025 上海一研生物科技有限公司版權所有  備案圖標.png滬ICP備14030958號-14    管理登陸    技術支持:化工儀器網    GoogleSitemap

    水蜜桃一二二区视在线| 香港aa三级久久三级老师2021国产三级精品三级在 | 999国产精品色在线播放| 日本精品自产拍在线观看中文| 亚洲爆乳精品无码一区二区| 男人日女人在线免费观看| 久久精品aⅴ无码中文字字幕重口| 99在线精品一区二区三区| 久久青青草原精品影院| 久久激情亚洲精品无码?V| 伊人久久综合精品无码AV专区| 国产成人亚洲合集青青草原精品| 国产成人tv在线观看| 国产午夜精品无码| 亚洲精品高清久久| 亚欧无码精品无码有性视频| 久久久国产乱子伦精品作者 | 久久99精品久久久久久噜噜| 中文国产成人精品久久不卡 | 国语自产精品视频在线观看| 久久亚洲精品视频| 国产精品 日韩欧美| 亚洲一区小说区中文字幕| 99爱在线精品免费观看| 精品欧美一区二区在线观看 | 国产精品亚洲片在线| 亚洲精品无码高潮喷水在线| 99精品无人区乱码在线观看| 国产精品无打码在线播放| 八戒久久精品一区二区三区| 精品视频第一页| 精品视频一区二区三区| 亚洲Av永久无码精品三区在线 | 国产精品无码免费播放| 亚洲一日韩欧美中文字幕欧美日韩在线精品一区二 | 国产精品自产拍在线18禁 | 99热亚洲色精品国产88| 久久久久久亚洲精品不卡| 精品久久无码中文字幕| 精品精品国产理论在线观看| 久久精品中文闷骚内射|