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    花青素還原酶(ANR)生化檢測試劑盒

    型 號

    產品時間2024-11-21

    所屬分類氧化與抗氧化系列

    報價

    產品描述:花青素還原酶(ANR)生化檢測試劑盒花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關鍵酶,在植物體內起非常重要的調控作用,對花青素還原酶的調控機制研究有利于從基因水平改變植物的品質。

    產品概述

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    產品名稱

    規格

    貨號

    花青素還原酶(ANR)生化檢測試劑盒

    100/96 50/48   

    EY-01S182

     

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    測定意義:

     花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關鍵酶,在植物體內起非常重要的調控作用,對花青素還原酶的調控機制研究有利于從基因水平改變植物的品質。

     測定原理:

     花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉變為表沒食子兒茶素和NADP,使反應體系在340nm處的吸光值下降,吸光值下降速率反應了花青素還原酶的活性。/p>

     需自備的儀器和用品:

     天平、研缽、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、蒸餾水。





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    試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

    試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

    試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

    試劑四:液體×1支,4℃保存。


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    1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

    2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

    3、血清等液體:直接測定。


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    (1)按照蛋白濃度計算

    活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

    =1608×△÷Cpr

    (2)按照樣本質量計算

    活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A÷W

    (3)按細胞數量計算

    活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

    =1608×△A ÷細胞數量

    (4)按液體體積計算

    活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

    ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

    =1608×△A

    ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。


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