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    糖含量生化檢測試劑盒

    型 號

    產品時間2024-11-22

    所屬分類蔗糖系列

    報價300

    產品描述:糖含量生化檢測試劑盒糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生糖。就哺乳動物而言,糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。

    產品概述

    商品屬性:

    產品名稱:糖含量生化檢測試劑盒

    規格:100/96 50/48 

    貨號 : EY-01S1215

    測試方法:微量法 可見分光光度法  

    分類:蔗糖系列

    商品詳情:

    測定意義:

    糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生糖。就哺乳動物而言,糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。

    測定原理:

    糖氧化酶催化糖氧化成糖酸,并產生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基偶聯酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。

    需自備的儀器和用品:

    可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水

    粗酶液提取:

    1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

    2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

    3、血清等液體:直接測定。


    5.png



    ADH測定操作:

    1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

    2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

    3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A測定管=A1-A2。

    測定步驟:

    1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

    2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

    3、操作表:

    試劑名稱μL

    測定孔

    樣本

    20

    試劑二

    760

    試劑三

    10

    試劑四

    10


    將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

    注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

    NAD-MDH活力單位的計算:

    1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

    單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

    2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

    (1)按樣本蛋白濃度計算:

    單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

    (2)按樣本鮮重計算:

    單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

    (3)按細菌或細胞密度計算:

    單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

    NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

    V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數,2000萬。

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